疏水層析填料主要包括常壓分離、減壓分離和加壓分離3種模式。常壓分離是簡單的分離模式方便、簡單,但是洗脫時間長。減壓分離盡管能節(jié)省填料的使用量,但是由于大量的空氣通過填料會使溶劑揮發(fā),并且有時在柱子外面會有水汽凝結,以及有些易分解的化合物也難以得到,而且還必須同時使用水泵或真空泵抽氣。加壓分離可以加快淋洗劑的流動速度,縮短樣品的洗脫時間,是一種比較好的方法,與常壓柱類似,只不過外加壓力使淋洗液更快洗脫。壓力的提供可以是壓縮空氣,雙連球或者小氣泵等。
疏水層析填料操作的九個技巧:
1、使用前首先明確自己的分離目的,即要做哪一方面的分離,從而選擇合適的凝膠填料,尤其對于沒有成熟工藝的學生和研發(fā)人員,請大家務必查閱文獻或者詢問老師,同時根據(jù)自己的分離要求,選擇合適長度和直徑的層析柱;??
2、選擇好層析柱和填料以后,嚴格按照填料的要求來操作,包括填料的溶脹、脫氣、裝柱,期間務必嚴格按照說明書操作;
3、適當控制上樣量,上樣以前務必要過0.22?m濾膜;
4、選擇合適的流動相,根據(jù)膠的性質(zhì)決定能否用泵加壓;
7、使用完畢后,請將層析柱做好處理,將層析柱堵好,以防干膠或者進氣泡,同時請做好試驗紀錄,以便下一位同學用時方便查詢使用情況;
8、試驗過程中所有用水或者溶液必須經(jīng)過抽濾和脫氣,嚴防氣泡;
9、若在使用過程中發(fā)生意外情況。
以上就是疏水層析填料的操作建議,供大家參考。