高效薄層層析板是用薄層層析硅膠,用適當(dāng)?shù)恼澈蟿┏浞只旌暇鶆蚝?,?jīng)脫氣處理使用進(jìn)口涂布機(jī)械均勻地涂布在潔凈的玻璃板上,晾干后,置于恒溫鼓風(fēng)干燥箱中經(jīng)105攝氏度活化半個(gè)小時(shí)而成。板面平整光潔,薄層均勻牢固,無(wú)龜裂、氣泡、掉粉等現(xiàn)象。
高效薄層層析板的特點(diǎn)以及制備:
高效薄層層析板是用高純度薄層層析硅膠調(diào)入一定量的粘結(jié)劑噴制成,板面純白、平整均勻、細(xì)密。
高效薄層層析板的特點(diǎn)為靈敏度高,斑點(diǎn)清晰,不擴(kuò)散,而且分離效果好,時(shí)間短。正是由于這些特點(diǎn),才使它能夠在市場(chǎng)上被廣泛應(yīng)用。
在制備高效薄層層析板時(shí)要關(guān)注液體往下流的速度,在操作時(shí)要均勻薄厚一致的鋪在載玻片上,然后舀一勺倒在載玻片中間,使其慢慢布滿(mǎn)整塊板面,后再用手輕輕鎮(zhèn)動(dòng)幾下,注意一定不要有氣泡。
目前,高效薄層層析板在醫(yī)藥、中草藥、有機(jī)化工產(chǎn)品、食品的成分及微量雜質(zhì)的鑒定中已得到普遍應(yīng)用。
高效薄層層析板制備步驟:
1.樣品的溶解:將薄層層析板樣品溶于展開(kāi)劑極性相近、揮發(fā)性高的有機(jī)溶劑。
2.點(diǎn)樣:控制上樣量,點(diǎn)樣基線(xiàn)距底邊2.0 cm,控制樣點(diǎn)直徑(5 mm)及點(diǎn)間距離(1-1.5 cm),避免因擴(kuò)散而影響檢測(cè)(下圖),點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。
3. 展層:展層容器必須密封,提前加入展開(kāi)溶劑,使溶劑蒸氣達(dá)到平衡。展開(kāi)劑不能高于上樣點(diǎn),否則,無(wú)法求得Rf值和準(zhǔn)確判斷粗產(chǎn)物中各組分在薄層板上的相對(duì)位置。
4. 薄層層析板展開(kāi)劑的選擇條件:有良好的溶解性、使待分離組分間分開(kāi)、待測(cè)組分的Rf值在0.2~0.8之間、不與待測(cè)組分或吸附劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)、沸點(diǎn)適中,黏度較小、展開(kāi)后組分斑點(diǎn)圓且集中、混合溶劑用新鮮配制。
5. 邊緣效應(yīng):邊緣效應(yīng)是樣品在層析時(shí),薄層板兩邊的斑點(diǎn)比中間斑點(diǎn)移動(dòng)快,并向兩邊偏斜。其原因是用混合溶劑展開(kāi)時(shí),極性較弱和沸點(diǎn)較低的溶劑在薄層板兩邊沿處較易揮發(fā),使薄層板上的展開(kāi)劑比例不一,而出現(xiàn)邊緣效應(yīng),解決邊緣效應(yīng)zui有效的方法是剪去薄層板浸入展開(kāi)劑一端的兩角。
高效薄層層析板的用途:在醫(yī)藥、農(nóng)藥、中草藥、有機(jī)化工產(chǎn)品及糧食、食品的微量雜質(zhì)及主要成份的鑒定中已得到普遍應(yīng)用。