最新精品香蕉在线_国产精品麻豆成人AV电影艾秋_国产精品激情_国产大片黄在线观看私人影院_快点我要高潮了好硬视频_无码a∨高潮抽搐流白浆

您的位置: 首頁 > 新聞動(dòng)態(tài) > 葡聚糖凝膠分離的步驟方法

葡聚糖凝膠分離的步驟方法

更新時(shí)間:2019-04-11瀏覽:1160次

  葡聚糖凝膠分離適用于天然產(chǎn)物在有機(jī)溶劑中的純化。例如:類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等,葡聚糖凝膠同時(shí)適用于分子類別非常相似的物質(zhì)的分離和工業(yè)規(guī)模的制備,既可用于初步純化步驟,也可以用于zui終精制步驟。
  葡聚糖凝膠分離方法:
  1. 乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí),并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;
  2. 無鹽水浸泡:室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時(shí),間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹,然后;
  3. 鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2N HCl浸泡12小時(shí),間隙攪拌,濾干,水洗只中性;
  4. 將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層;
  5. 上樣前平衡層析柱至少3-5 個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer 的PH值);
  6. 凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20% 的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm以下,過高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時(shí)高徑比為5:1 即可;
  7. 洗脫方法:可以用無鹽水,也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱Buffer 中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*讓葡聚糖凝膠分離純化;
  8. 在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h 用1M 氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積,再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。

 

Contact Us
  • QQ:1919489259
  • 郵箱:dubin@inlucktech.com
  • 傳真:86-010-83893981
  • 地址:北京市朝陽區(qū)建國路15號院甲1號華文國際傳媒大廈

掃一掃  瀏覽網(wǎng)站

©2024 北京英萊克科技發(fā)展有限公司 版權(quán)所有    備案號:京ICP備13010341號-2    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    Sitemap.xml    總訪問量:363441    管理登陸